Cushing综合征是常见的内分泌与遗传代谢性疾病，患者多数就诊于内分泌科。对于此病的诊断，往往比较能精确的确诊，在结合其典型的临床表现及实验室检查后，还应排除其它引起相同症状的疾病(如肥胖症、酗酒兼有肝功能的损伤以及抑郁症患者)，不同病因引起的库欣综合征的实验室及影像学往往具有特异性，因此应当尽量做好病因诊断。
确诊该病需要结合临床表现(见上图)及实验室检查：
1、临床表现：有典型症状体征者，看到向心性肥胖及满月脸及痤疮就要想到这个疾病，但早期的以及不典型病例，特征性症状不明显或未被重视，则就需要依赖下面所说的试验检查与辅助检查。
2、各型库欣综合征共有的糖皮质激素分泌异常：皮质醇分泌增多，失去昼夜分泌节律，且不能被小剂量地塞米松抑制。
(1)血浆皮质醇昼夜节律，正常成人早晨8时均值为(275+66)nmol/L(范围165~441nmol/L);下午4时均值为(129.6+52.4)nmol/L(范围55~248nmol/L);午夜12时均值为(96.5+33.1)nmol/L(范围 55~138nmol/L)。如果有人测血皮质醇浓度早晨高于正常，晚上不明显低于清晨(表示正常的昼夜节律消失)，就可以考虑此病;
(2)尿游离皮质醇多在304nmol/24h以上{正常人尿排泄量为130~304nmol/24h，均值为(207+44)nmol/24h)},因其能反映血中游离皮质醇水平，且少受其他色素干扰，阳性可诊断为库欣综合征;
(3)小剂量地塞米抑制试验：具体方法为每6小时口服地塞米0.5mg，或每8小时服0.75mg，连服2天，第二天尿17- 羥皮质类固醇不能被抑制到对照值的50%以下，测第1日血浆皮质醇作为对照值，当天午夜口服地塞米松1㎎，于次日晨血浆皮质醇不能抑制到对照值的50%以下。若为阳性则可确诊;
需知，该病的病因诊断也很重要，当在上诉临床症状及实验室检查上无法确诊时，也可配合影像学检查(特别是胸部CT及蝶鞍的X线片)，若患者家庭经济许可，可查头颅MRI及PET-CT，另外，肾上腺的彩超对于部分库欣综合征可以准确的显像，也可以作为诊断方法之一。
