酪氨酸酶的测定可采用分光光度法、放射测量法和酶偶联分析等多种方法。
1.分光光度法：利用底物与产物之间光吸收性质上的差异，反应混合物的底物减少或产物增加都可以被直接测定。酪氨酸酶能够催化L-多巴生成多巴色素，该产物特征吸收峰出现在475nm处，通过吸光值变化可对酪氨酸酶活性进行表征。此法测定快速、简便，采用自动扫描分光光度计，为酶活力的准确测定提供了很大的便利。
2.放射测量法：酶活力测定中较为常用的一种方法。这种测定方法简便快速，但由于使用放射源较多，操作繁琐，通常采用放射性同位素对底物进行标记。在反应进行到一定程度时，分离出具有放射性同位素标记的产物，对其放射性进行测量，即可测出反应进行的速度。常用的同位素有3H、14C、32P、35S、131I等。
3.酶偶联分析：酶偶联分析的基本方法是利用某种专一性很强的工具酶，将被测酶反应持续到一个可以连续、简单、准确的测定阶段。
另外，体内酪氨酸酶的功能主要集中于黑色素合成过程中的关键酶，酪氨酸酶的活性下降时，会对黑色素合成代谢产生影响，血清可检测到酪氨酸酶的抗体，故也可通过测定抗酪氨酸酶抗体水平间接测定酪氨酸酶。
