免疫组化检测不存在正常范围,它不同于血常规等检查,因为免疫组化结果需要综合肿瘤的形态等因素进行分析。如果某一项免疫组化阳性并不代表提示恶性肿瘤,反而有时免疫组化阴性则支持恶性诊断。大部分疾病是从HE切片形态上分析。如果觉得像A病,但又不能排除B病,且也无法排除C病,这时需要开较多免疫组化抗体的检查,通过它的阳性、阴性以及表达量高低进行判断,最后拿到证据。几种常用免疫组化方法简单介绍。
1.免疫荧光方法
利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用较广。
2.免疫酶标方法
先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是最常用的技术。
3.免疫胶体金技术
免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。由于胶体金本身呈淡至深红色,因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。